Фармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология icon

Фармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология



НазваниеФармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология
страница2/4
ЖЕЛТОВА АНАСТАСИЯ АЛЕКСАНДРОВНА
Дата конвертации11.02.2013
Размер363.25 Kb.
ТипАвтореферат
источник
1   2   3   4
^

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования


Эксперименты проводили на 510 половозрелых нелинейных белых крысах обоего пола массой 250-350 г и 50 белых неинбредных мышах-самцах массой 18-32 г, содержавшихся в условиях вивария (температура 22-24°С, относительная влажность воздуха 40-50%) с естественным световым режимом на сбалансированной диете, удовлетворяющей требованиям «Руководства по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских технологиях» [Каркищенко Н.Н., 2010], в условиях свободного доступа к отстоянной водопроводной воде (содержание элементарного Mg 20 мг/л). У животных вызывали алиментарную гипомагнезиемию путем содержания на сбалансированной Mg-дефицитной диете, содержавшей 20% казеина, 70% крахмала, 0,3% DL-метионина, 0,2% холина битартрата, 5% кукурузного масла, 1% поливитаминной смеси и 3,5% полиминеральная смесь, аналогичная полиминеральной смеси AIN-76 (MP Biomedical), не содержащая Mg, в течение 2 мес при свободном доступе к дистиллированной воде. Исследование одобрено Региональным независимым этическим комитетом при Волгоградском научном центре РАМН и Администрации Волгоградской области (протокол № 93-2009 от 14.03.2009 г.) и выполнялось в соответствии с Международными рекомендациями Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях (1997), и требованиями «Правил лабораторной практики», утвержденных приказом Минздравсоцразвития РФ от 23 августа 2010 г. № 708н.

В работе были изучены 9 различных органических и неорганических солей магния: магния сульфата гептагидрат (ОАО «Химзавод им. Л.Я.Карпова», Россия), магния хлорида гексагидрат (ООО «Реахимсервис», Россия), магния L-аспарагинат (ЗАО «Биоамид», Россия), магния оксибутират, магния тауринат, магния N-ацетилтауринат, магния цитарат, магния глицинат и магния сукцинат (были синтезированы на кафедре фармацевтической и токсикологической химии ВолгГМУ д.х.н., профессором А.А. Озеровым1). Исследование острой токсичности соединений при внутрибрюшинном введении проводилось в соответствии с требованиями [Хабриев Р.У., 2005]. Расчет величины LD50 проводили пробит-анализом с использованием алгоритма максимального правдоподобия [Finney D.J., 1971] с помощью утилиты Probit Analysis 4.

Скорость и степень развития гипомагнезиемии у животных опытной группы определяли по содержанию магния в плазме крови и эритроцитах спектрофотометрически по цветной реакции с титановым желтым [Меньшиков В.В., 1987]. После достижения целевого уровня гипомагнезиемии крысам в течение 14 сут вводили соли магния в дозах, соответствующих 50 мг элементарного Mg/кг массы тела.

Для характеристики окислительного стресса определяли фотометрически: гидроперекиси и липоперекиси липидов с ксиленоловым оранжевым [Hermes-Lima M. e.a., 1995], малоновый диальдегид с тиобарбитуровой кислотой [Андреева Л.И., Кожемякин Л.А., 1988], карбонильные продукты окислительной модификации белков с 2,4-динитрофенилгидразином [Hawkins C.L. e.a., 2009], общую антиоксидантную активность (ОАОА) по обесцвечиванию катион-радикала АБТС (AБТС•+) [Re R. e.a., 1999] (в модификации [Шушкова И.Г. и др., 2010]), тиолы с реактивом Эллмана [Ellman G.L., 1959]. Общее содержания белка в сыворотке (плазме) крови устанавливали биуретовым методом с использованием коммерческого набора реактивов производства «Витал Девелопмент Корпорэйшн» (Россия). Фотометрические измерения проводили на спектрофотометре APEL PD-303UV (Япония).

Определение маркеров функции эндотелия (эндотелина, эндотелиальной NO-синтазы – eNOS, VCAM-1) и системного воспаления (С-реактивного белка – СРБ, интерлейкина-6 – IL-6, фактора некроза опухоли TNFα) проводили иммунохимически коммерческими наборами реактивов производства BioVendor (Чехия), Biomedica (Австрия), eBioscience (Австрия) и Uscn Life Science (КНР). Определение оксида азота и его метаболитов нитрита и нитрата проводили колориметрически с реактивом Грисса коммерческими наборами реактивов (R&D Systems, США). Указанные измерения проводили на универсальном микропланшетном ридере ELX 800 производства фирмы Bio-Tek Instruments, Inc (США).

Время тромбообразования оценивали на модели артериального тромбоза, вызванного поверхностную аппликацию 50% раствора хлорида железа(III) на сонную артерию [Kurz K.D. e.a., 1990]. Момент окклюзии артерии определяли по прекращению пульсации выше участка аппликации, измеренной доплерографически неинвазивным способом «Минимакс-Доплер-К» (Санкт-Петербург).

Основные показатели кардио- и гемодинамики определяли у животных после наркотизации этаминалом натрия (40 мг/кг, в/бр) в условиях искусственной вентиляции легких с помощью системы обработки сигналов ВЕАТ (РКНПК РАМН, Россия) измерялись внутрижелудочковое давление и его первая производная (+dp/dt и -dp/dt), частота сердечных сокращений и систолическое и диастолическое артериальное давление. Величину интенсивности функционирования структур (ИФС) получали расчетным способом по формуле [Меерсон Ф.З., 1981; Тюренков И.Н. и др., 2006]:

,

где m – масса левого желудочка + 2/3 массы межжелудочковой перегородки в мг, ЧСС – частота сердечных сокращений, ЛЖД – левожелудочковое давление.

Измерение кардиогемодинамических показателей проводили до и после функциональных нагрузочных проб: нагрузки объемом (быстрое внутривенное введение изотонического раствора NaCl 3 мл/кг), стимуляции адренорецепторов сердца (внутривенное введение адреналина 1 нг/кг), изометрической нагрузки (пережатие восходящей части дуги аорты на 20 секунд) [Тюренков И.Н. и др., 2006]. Морфологическое исследование ткани миокарда крыс проводили по общепринятым гистологическим методикам после фиксации формалином и окраски гематоксилином и эозином по Масону или гематоксилином, основным фуксином и пикриновой кислотой по Ли. Фотографии препаратов цифровой фотокамерой Canon (5 Мп) на базе микроскопа Axiostar Plus (Carl Zeiss, Германия) с использованием объективов 10× и 40× и окуляра 10× использовали для морфометрического анализа2. Определение кобальт-связывающей способности сыворотки крови (маркер ишемии миокарда) проводили по [Bar-Or D. e.a., 2000] в модификации [Литус Е.А. и др., 2008; Лопатин Ю.М. и др., 2011]. Некротическое повреждение миокарда вызывали введением токсических доз изопротеренола (30 мг/кг, п/к, дважды с интервалом 24 ч) [Kung H.F., Blau M., 1978]. В качестве маркеров некроза кардиомиоцитов активность аспартатаминотрансферазы (АсАТ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и креатинкиназы (КК) коммерческими наборами производства «Витал Девелопмент Корпорэйшн» (Россия).

Описание количественных признаков и статистический анализ данных в полученных выборках проводили в соответствии с рекомендациями, изложенными в [Гланц С., 1998; Реброва О.Ю., 2002]. Все статистические расчеты проводили с применением пакета прикладных программ Statistica for Windows 6.0, фирмы StatSoft, Inc. (США). Наличие различий между выборками несвязанных между собой данных по количественному признаку проверяли с помощью непараметрического дисперсионного анализа (ANOVA) по Краскелу – Уоллесу; если достигался уровень р < 0,05, то проводили дополнительное попарное сравнение выборок с использованием U-критерия Манна – Уитни. Гипотезу о существовании различий между выборками принимали при уровне р<0,05.
1   2   3   4




Похожие:

Фармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология iconФармакологическая коррекция функционального состояния спортсменов на базовом этапе тренировочного процесса в условиях дизадаптации 14. 00. 25 Фармакология, клиническая фармакология 03. 03. 01 Физиология
...
Фармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология iconКлинико-фармакоэкономические аспекты лечения больных ибс, подвергшихся реваскуляризации миокарда 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология 14. 01. 05 кардиология
Работа выполнена в гоу впо «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития...
Фармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология iconСравнительная оценка клинико-экономической эффективности лозартана, зофеноприлА и периндоприла у больных с острым инфарктом миокарда и артериальной гипертензией 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология
Работа выполнена в гоу впо «Ярославская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития...
Фармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология iconОптимизация и коррекция терапии нарушений углеводного обмена с помощью воздействия на эндорфинергические и серотонинергические структуры мозга 14. 00. 25 фармакология, клиническая фармакология 14. 00. 05 внутренние болезни
Работа выполнена в гоу впо «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития...
Фармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология iconКлиническая эффективность и фармакоэпидемиология лекарственных средств у детей с аллергическим ринитом 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология
Работа выполнена в гоу впо «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения
Фармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология iconКлиническая эффективность и аспекты механизма действия батиона (антитела к рецептору инсулина) у больных с сахарным диабетом типа 2 14. 00. 25 фармакология, клиническая фармакология
Работа выполнена в гоу впо «Волгоградский государственный медицинский университет Росздрава»
Фармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология iconНаучные направления
...
Фармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология iconХронофармакология антигипертензивных средств при метаболическом синдроме 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология
Работа выполнена в гбоу впо «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ
Фармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология iconФармакоэпидемиологическое и фармакоэкономическое исследование терапии вич-инфекции 14. 03. 06 Фармакология, клиническая фармакология
Работа выполнена в гбоу впо «Ярославская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития...
Фармакологическая коррекция дисфункции эндотелия и ишемии миокарда в условиях экспериментального дефицита магния 14. 03. 06 фармакология, клиническая фармакология iconФармакоэпидемиологический анализ использования средств растительного происхождения при беременности 14. 03. 06 Фармакология, клиническая фармакология
...
Разместите кнопку на своём сайте:
Документы


База данных защищена авторским правом ©zazdoc.ru 2000-2014
При копировании материала обязательно указание активной ссылки открытой для индексации.
обратиться к администрации
Документы